<em id="zvxnp"><progress id="zvxnp"><progress id="zvxnp"></progress></progress></em>
<big id="zvxnp"></big>

    <menuitem id="zvxnp"><form id="zvxnp"></form></menuitem>

      <var id="zvxnp"></var>

        <p id="zvxnp"><track id="zvxnp"><progress id="zvxnp"></progress></track></p>
        <em id="zvxnp"><track id="zvxnp"><progress id="zvxnp"></progress></track></em>

        <listing id="zvxnp"><dfn id="zvxnp"></dfn></listing>

        歡迎來到漠寶(廈門)生物科技有限公司網站!
        新聞詳情
        首頁 > 新聞中心 > 總結His抗體蛋白純化的常見問題及解決方法

        總結His抗體蛋白純化的常見問題及解決方法

        點擊次數:184發布時間:2022-01-04
          His抗體能夠特異性識別His標簽,可以用于定性定量檢測His融合蛋白的表達、細胞內定位等。為了讓大家詳細的了解該抗體,下面小編就介紹一下標簽抗體進行蛋白純化常見的問題及解決方法。
          
          His抗體蛋白純化常見問題:
          
          一、蛋白不和介質結合
          
          可能原因:超聲功率不合適(太大,蛋白碳化,太小,蛋白沒完全釋放)
          
          解決方法:改變超聲功率或者其它方法破碎細胞。
          
          樣品或緩沖液不合適
          
          解決方法:確保緩沖液中螯合劑,還原劑,咪唑濃度不是很高。
          
          His標簽暴露不完全
          
          解決方法:在緩沖液中加變性劑(4-8M尿素,4-6M鹽酸胍),然后用IMAC介質純化。
          
          His標簽丟失
          
          解決方法:必要時增加His的個數并確保正確表達,同時降低上樣速度,確保足夠的孵育時間。
          
          二、His抗體蛋白結合在介質上洗脫困難
          
          1、可能原因:洗脫條件太溫和
          
          解決方法:增加洗脫咪唑濃度或降低pH。
          
          2、可能原因:蛋白沉積在介質上
          
          解決方法:減少上樣量,優化層析條件。
          
          3、可能原因:非特異性結合
          
          解決方法:緩沖液加2%TritonX-100和NaCl。
          
          三、洗脫峰雜質多
          
          可能原因:非特異性結合,清洗不徹底,降解等。
          
          解決方法:純化過程加蛋白抑制劑防止降解,上樣完后要徹底清洗,加一定的NaCl和咪唑減少非特異性結合。
          
          四、使用幾次,介質結合效率降低,柱效降低
          
          可能原因:介質上沉積大量雜質等
          
          解決方法:徹底清洗,IDA/IMAC脫鎳再生處理。
        Copyright © 2022 漠寶(廈門)生物科技有限公司 版權所有
        狠狠做五月深爱婷婷天天综合
        <em id="zvxnp"><progress id="zvxnp"><progress id="zvxnp"></progress></progress></em>
        <big id="zvxnp"></big>

          <menuitem id="zvxnp"><form id="zvxnp"></form></menuitem>

            <var id="zvxnp"></var>

              <p id="zvxnp"><track id="zvxnp"><progress id="zvxnp"></progress></track></p>
              <em id="zvxnp"><track id="zvxnp"><progress id="zvxnp"></progress></track></em>

              <listing id="zvxnp"><dfn id="zvxnp"></dfn></listing>